Estudo por oxido-redução de uma proteina tirosina fosfatase (CD45) purificada de membrana de linfocitos humanos

TL;DRAbstract

As proteinas tirosina fosfatases (PTP) (EC 3.1.3.48) sao enzimas regulatorias chaves que participam na transducao de sinal e sao essenciais na regulacao do crescimento, diferenciacao, ciclos celulares, na transcricao genica, resposta imune e outros processos. Esta classe de enzimas, que contem cisteina no sitio ativo, pode ser inativada por agentes oxidantes. Neste trabalho, estudamos os efeitos de peroxido de hidrogenio e t-butil hidroperoxido, compostos que induzem estresse oxidativo, na atividade de uma PTP purificada de membranas de linfocitos humanos, indicativamente a CD45. A PTP foi purificada de membranas de linfocitos humanos atraves de cromatografias de troca ionica (DEAE Sepharose) e exclusao molecular (Sephacryl S-200). A purificacao enzimatica foi acompanhada por SDS-PAGE e eletroforese bidimensional. A atividade enzimatica foi determinada atraves de incubacao a 37°C por 30 min em pH 5,0 em presenca de 5 mM de p-nitrofenil fosfato (pNPP) como substrato. A enzima obtida da

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