Desenvolvimentos metodológicos em proteômica estrutural por espectrometria de massa
TL;DRAbstract
A espectrometria de massas (MS) consiste no estudo dos ions em fase gasosa, tendo como uma das suas principais aplicacoes a caracterizacao estrutural de moleculas. Desde o inicio da tecnica, ela vem sendo empregada na elucidacao estrutural de um grande numero de moleculas orgânicas e e hoje uma das principais ferramentas de caracterizacao estrutural. Dentro os metodos baseado em MS para o estudo de estruturas superiores de proteinas desenvolvidos recentemente estao aqueles conhecidos como footprinting e ligacao cruzada (cross-linking). Nesta tese, estudos foram realizados para o desenvolvimento, melhorias e otimizacao de tecnicas de footprinting e ligacao cruzada acopladas a espectrometria de massas para o estudo estrutural de proteinas. Em footprinting, foram desenvolvidas fontes alternativas de radiacao UV para geracao de radicais ?OH a partir da fotolise do H2O2 para mapeamento da superficie exposta ao solvente de proteinas, bem como o desenvolvimento de uma tecnica mais apropriada
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A espectrometria de massas (MS) consiste no estudo dos ions em fase gasosa, tendo como uma das suas principais aplicacoes a caracterizacao estrutural de moleculas. Desde o inicio da tecnica, ela vem sendo empregada na elucidacao estrutural de um grande numero de moleculas orgânicas e e hoje uma das principais ferramentas de caracterizacao estrutural. Dentro os metodos baseado em MS para o estudo de estruturas superiores de proteinas desenvolvidos recentemente estao aqueles conhecidos como footprinting e ligacao cruzada (cross-linking). Nesta tese, estudos foram realizados para o desenvolvimento, melhorias e otimizacao de tecnicas de footprinting e ligacao cruzada acopladas a espectrometria de massas para o estudo estrutural de proteinas. Em footprinting, foram desenvolvidas fontes alternativas de radiacao UV para geracao de radicais ?OH a partir da fotolise do H2O2 para mapeamento da superficie exposta ao solvente de proteinas, bem como o desenvolvimento de uma tecnica mais apropriada
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