Purificação e caracterização bioquimica e farmacologica de uma fosfolipase A2 neurotoxica presente no veneno de Bothrops alternatus
TL;DRAbstract
O veneno total de Botrhops alternatus (10 mg) foi fracionado por meio de coluna m-Bondapack C18 e HPLC de fase reversa resultando em um pico ativo denominado BT II 2. Em SDS-PAGE, a toxina originou uma banda unica, isolada de 14 KDa. A fracao BT II 2 (0,1, 0,5, 1,0, 5,0, 10,0 e 20,0 mg/mL n=7) induziu um bloqueio irreversivel da resposta contratil, em preparacoes musculo biventer cervicis de pintainho, sendo esse dose-dependente. As respostas contraturantes a adicao exogena de acetilcolina e cloreto de potassio nao foram significativamente diferentes do controle.Os tempos necessarios para se obter bloqueio neuromuscular de 50 e 90% foram de 66 _+10 para 0,1mg/mL,44_+3 para 0,5mg/mL ,para 1 mg/mL foi de 38 _+4, 54_+5 para 5mg/mL o tempo foi de 24_+1, 34_+1, para 10mg/mL foi de 22_+2, 35_+2 e para 20mg/mL foi de 24_+5,33_+6 respectivamente. Fig. 9. Alteracoes morfologicas foram observadas nas fibras musculares. Entretanto, a concentracao da fracao BTII2, 1 ?g/mL, foi mais potente para in
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O veneno total de Botrhops alternatus (10 mg) foi fracionado por meio de coluna m-Bondapack C18 e HPLC de fase reversa resultando em um pico ativo denominado BT II 2. Em SDS-PAGE, a toxina originou uma banda unica, isolada de 14 KDa. A fracao BT II 2 (0,1, 0,5, 1,0, 5,0, 10,0 e 20,0 mg/mL n=7) induziu um bloqueio irreversivel da resposta contratil, em preparacoes musculo biventer cervicis de pintainho, sendo esse dose-dependente. As respostas contraturantes a adicao exogena de acetilcolina e cloreto de potassio nao foram significativamente diferentes do controle.Os tempos necessarios para se obter bloqueio neuromuscular de 50 e 90% foram de 66 _+10 para 0,1mg/mL,44_+3 para 0,5mg/mL ,para 1 mg/mL foi de 38 _+4, 54_+5 para 5mg/mL o tempo foi de 24_+1, 34_+1, para 10mg/mL foi de 22_+2, 35_+2 e para 20mg/mL foi de 24_+5,33_+6 respectivamente. Fig. 9. Alteracoes morfologicas foram observadas nas fibras musculares. Entretanto, a concentracao da fracao BTII2, 1 ?g/mL, foi mais potente para in
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