5-aza-dC和丁酸钠对人胃癌MKN-28细胞Runx3基因表达及其甲基化的影响

TL;DRAbstract

目的探讨去甲基化制剂5-氮-2乞脱氧胞苷（5-aza-dc）和组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠联合干预对人胃癌MKN-28细胞Rumx3基因表达及其甲基化的影响。方法RT—PCR检测5-氮-2’-脱氧胞苷和丁酸钠联合干预后Runx3mRNA的表达，WesternBlot检测5-氮-2。脱氧胞苷和丁酸钠联合干预后Runx3蛋白的表达，MSP检测5-氮-2乞脱氧胞苷干预后MKN-28细胞中Runx3基因启动子区域甲基化状态的变化。结果10μmol／L的5-氮-2乞脱氧胞苷干预人胃癌MKN-28细胞72h后，Runx3mKNA及蛋白重新表达，基因及蛋白表达相对量分别为0．63＋0．05和0．38＋0．04，2．5mmol／L的丁酸钠不能诱导MKN-28细胞中Runx3mRNA及蛋白的表达，10pomol／L的5-氮-2’-脱氧胞苷及2．5mmol／L的丁酸钠联合干预72h后，Runx3mRNA及蛋白重新表达，基因及蛋白表达相对量分别为0．86＋0．02和0．62＋0．02，联合应用比单用5-氮-2’-脱氧胞苷可显著增强Runx3基因及蛋白表达（P均〈0．05）；10μmol／L的5-氮-2乞脱氧胞苷干预72h后，MSP检测发现MKN-28细胞中仅非甲基化序列有扩增产物，Runx3基因启动子区域呈去甲基化状态。结论5-氮-2，-脱氧胞苷可诱导MKN-28细胞Runx3基因及蛋白重新表达，丁酸钠不能诱导Runx3基因及蛋白的表达，联合干预对MKN-28细胞Runx3基因及蛋白的表达有协同作用；5-氮-2’-脱氧胞苷可逆转MKN-28细胞中Runx3基因启动子区域的高甲基化状态。

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