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The function of recombinant human apolipoprotein A-IV from E. coli

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TL;DRAbstract

Menschliches Apolipoprotein (Apo) A-IV, 46 kD, ist in vitro in der Lage, das Enzym Lecithin-Cholesterin-Acyltransferase (LCAT) zu aktivieren, an Apo A-I/A-IIRezeptoren von Maus-Adipozyten zu binden und Cholesterinausstrom aus diesen Zellen zu vermitteln. Diese Beobachtungen, zusammen mit dem Vorkommen von Apo A-IV in der interstitiellen Flüssigkeit, sprechen für die Mitwirkung von Apo A-IV beim Cholesterinrücktransport. Um große Mengen dieses Proteins zu erhalten und gezielte Mutanten herzustellen, wurde menschliches Apo A-IV in Escherichia coli exprimiert. Das rekombinante Protein war löslich und konnte ohne Lipidextraktion oder Denaturierung isoliert werden. Die Charakterisierung des exprimierten Proteins zeigte einen zusätzlichen Methioninrest N-terminal, war jedoch ansonsten in seinen physikochemischen Eigenschaften identisch mit Apo A-IV aus menschlichem Plasma. In bezug auf die Funktion zeigte das rekombinante Apo A-IV im Vergleich mit Apo A-IV aus menschlichem Plasma gleiche Kof

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Menschliches Apolipoprotein (Apo) A-IV, 46 kD, ist in vitro in der Lage, das Enzym Lecithin-Cholesterin-Acyltransferase (LCAT) zu aktivieren, an Apo A-I/A-IIRezeptoren von Maus-Adipozyten zu binden und Cholesterinausstrom aus diesen Zellen zu vermitteln. Diese Beobachtungen, zusammen mit dem Vorkommen von Apo A-IV in der interstitiellen Flüssigkeit, sprechen für die Mitwirkung von Apo A-IV beim Cholesterinrücktransport. Um große Mengen dieses Proteins zu erhalten und gezielte Mutanten herzustellen, wurde menschliches Apo A-IV in Escherichia coli exprimiert. Das rekombinante Protein war löslich und konnte ohne Lipidextraktion oder Denaturierung isoliert werden. Die Charakterisierung des exprimierten Proteins zeigte einen zusätzlichen Methioninrest N-terminal, war jedoch ansonsten in seinen physikochemischen Eigenschaften identisch mit Apo A-IV aus menschlichem Plasma. In bezug auf die Funktion zeigte das rekombinante Apo A-IV im Vergleich mit Apo A-IV aus menschlichem Plasma gleiche Kof

Keywords

Molecular biologyChemistryApolipoprotein BEscherichia coliBiologyBiochemistryGeneCholesterol

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