Expressão do gene da alfa-amilase de Bacillus subtilis em Xanthomonas campestris
TL;DRAbstract
A bacteria Xanthomonas campestris e um fitopatogeno que produz a goma xantana, de grande importância economica, devido ao seu variado potencial de utilizacao na Industria e na agricultura. Com o objetivo de se verificar a expressao de um gene de amilase exogeno em X.campestris, estabeleceu-se um sistema de clonagem para esta bacteria. Este sistema constituiu-se no plasmidio promiscuo pMFY40 ao qual se inseriu o gene da alfa-emllese de Bacillus subtilis, resultando no plesmidio pAP1. Este plesmidio possui aproximadamente 14.0 Kb, a mobilizavel por plasmidios ?helper? e razoavelmente estavel, em condicoes de fermentacao, em X. campestris. O pAP1 foi introduzido por transformacao e por conjugacao em duas linhagens de campestris, uma delas originalmente amilolitica (REF) e outra nao-amilolitica (280), mas que e uma boa produtora de goma. Apos se verificar a secrecao da enzima em meio solido pelos recombinantes, analisou-se o consumo de amido e a producao de acucar redutor em meto liquido.
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A bacteria Xanthomonas campestris e um fitopatogeno que produz a goma xantana, de grande importância economica, devido ao seu variado potencial de utilizacao na Industria e na agricultura. Com o objetivo de se verificar a expressao de um gene de amilase exogeno em X.campestris, estabeleceu-se um sistema de clonagem para esta bacteria. Este sistema constituiu-se no plasmidio promiscuo pMFY40 ao qual se inseriu o gene da alfa-emllese de Bacillus subtilis, resultando no plesmidio pAP1. Este plesmidio possui aproximadamente 14.0 Kb, a mobilizavel por plasmidios ?helper? e razoavelmente estavel, em condicoes de fermentacao, em X. campestris. O pAP1 foi introduzido por transformacao e por conjugacao em duas linhagens de campestris, uma delas originalmente amilolitica (REF) e outra nao-amilolitica (280), mas que e uma boa produtora de goma. Apos se verificar a secrecao da enzima em meio solido pelos recombinantes, analisou-se o consumo de amido e a producao de acucar redutor em meto liquido.
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