TL;DRAbstract
目的 克隆和构建携带人低氧诱导因子-1α（HIF-1α）的Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE-HIF-1α。方法 以缺氧的肝癌细胞株HepG2总RNA为模板，进行RT-巢式PCR，获得HIF-1α的cDNA，克隆入Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE2hyg，酶切重组子鉴定。将构建好的PTRE-HIF-1α用脂质体法转入HepG2Tet-on细胞，在强力霉素的作用下，用RT-PCR及Western blot法鉴定重组质粒的表达。结果 扩增出HIF-1α的cDNA测序结果与Genbank记载完全一致，并成功克隆入PTRE2hyg，将反应质粒PTRE-HIF-1α转入HepG2Tet-on细胞，可以完整有效表达HIF-1α且受强力霉素的调控。结论 成功克隆和构建携带HIF-1α基因的Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE-HIF-1α，并证明其表达能在HepG2Tet-on细胞中受强力霉素调控。
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目的 克隆和构建携带人低氧诱导因子-1α（HIF-1α）的Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE-HIF-1α。方法 以缺氧的肝癌细胞株HepG2总RNA为模板，进行RT-巢式PCR，获得HIF-1α的cDNA，克隆入Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE2hyg，酶切重组子鉴定。将构建好的PTRE-HIF-1α用脂质体法转入HepG2Tet-on细胞，在强力霉素的作用下，用RT-PCR及Western blot法鉴定重组质粒的表达。结果 扩增出HIF-1α的cDNA测序结果与Genbank记载完全一致，并成功克隆入PTRE2hyg，将反应质粒PTRE-HIF-1α转入HepG2Tet-on细胞，可以完整有效表达HIF-1α且受强力霉素的调控。结论 成功克隆和构建携带HIF-1α基因的Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE-HIF-1α，并证明其表达能在HepG2Tet-on细胞中受强力霉素调控。
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