Modificações do DNA por acetona triplete gerada na oxidação de 2-metilpropanal em presença de peroxidase

TL;DRAbstract

A incubacao de 2-metilpropanal em tampao saturado com ar causa uma reacao de oxidacao iniciada pela formacao de composto-I de peroxidase (HRP-I) e HRP-II para produzir acetona no estado excitado e acido formico. O pH otimo e ao redor de 7,0 e o kM a 40°C e 30 mM. Experimentos na presenca e na ausencia de ions metalicos sugerem que a peroxidase usa tracos de H2O2 gerado durante a. incubacao, para a formacao de HRP-I. Aparentemente em HRP-I e HRP-II o sitio de ligacao do substrato esta ocupado por especies fortemente ligadas as quais cianeto (10 mM) e azoteto (10 mM) nao podem deslocar. A nao linearidade de resposta para concentracoes superiores a 2,2 mm de peroxidase e a razao kHAsO4/kHPO4 indicam uma eficiencia de catalise relacionada com enolizacao de cetonas. As modificacoes estruturais do DNA depois do tratamento com acetona triplete gerada pelo sistema 2-metil propanal/peroxidase/O2 foram estudadas, usando-se terbio (III), acridina laranja e proflavina como sondas fluorescentes. Os

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