Entwicklung polymerbeschichteter DNA-Chip-Oberflächen für enzymatisch unterstützte Genotypisierungen
TL;DRAbstract
Die DNA-Chiptechnologie bildet einen innovativen und effizienten Ansatz in der genetischen Diagnostik. Fur diese Technologie stellen wir die Entwicklung von Polymerbeschichtungen auf Glasoberflachen vor, welche die Analyse geringer DNA-Mengen durch die Methode der ALR (Arrayed Ligation Reaction) ermoglicht. Dieses Verfahren wurde fur den spezifischen Nachweis von Schimmelund Hausfaulepilzen bei der Biotype Diagnostic GmbH etabliert (Tafel 1). Neben der Hybridisierung komplementarer DNA-Strange findet dabei eine spezifische Enzymreaktion statt, bei der ein fluoreszenzmarkiertes DNA-Oligonukleotid kovalent an immobilisierte DNA-Sonden des Mikroarrays und damit an den DNA-Chip gebunden wird (Bild 1). Diese Ligationsreaktion findet jedoch nur statt, wenn die DNA-Zielsequenz zur Sonde und zum Ligationsoligonukleotid komplementar ist. [1-3]
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Die DNA-Chiptechnologie bildet einen innovativen und effizienten Ansatz in der genetischen Diagnostik. Fur diese Technologie stellen wir die Entwicklung von Polymerbeschichtungen auf Glasoberflachen vor, welche die Analyse geringer DNA-Mengen durch die Methode der ALR (Arrayed Ligation Reaction) ermoglicht. Dieses Verfahren wurde fur den spezifischen Nachweis von Schimmelund Hausfaulepilzen bei der Biotype Diagnostic GmbH etabliert (Tafel 1). Neben der Hybridisierung komplementarer DNA-Strange findet dabei eine spezifische Enzymreaktion statt, bei der ein fluoreszenzmarkiertes DNA-Oligonukleotid kovalent an immobilisierte DNA-Sonden des Mikroarrays und damit an den DNA-Chip gebunden wird (Bild 1). Diese Ligationsreaktion findet jedoch nur statt, wenn die DNA-Zielsequenz zur Sonde und zum Ligationsoligonukleotid komplementar ist. [1-3]
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