Extração, purificação e propriedades da polifenoloxidase da banana nanica Musa cavendishii, L.
TL;DRAbstract
A polifenoloxidase de banana nanica (Musa cavendishii L.) foi extraida da parte central da fruta semi-madura, em solucao de tampao fosfato 0,2 M, pH 7,0, contendo II de PVP insoluvel e 0,5a de Triton X-100 por homogeneizacao em liquidificador na temperatura ambiente. 0 extrato bruto foi precipitado com 2 volumes de acetona previamente resfriada, e a mistura mantida a uma temperatura final de -13°C. O precipitado acetonico foi re-extraido com tampao fosfato pH 7,0, contendo 0,5% de Tri- ton X-100 e estocado a -40°C por 7 dias. O material insoluvel obtido apos este periodo, foi eliminado por centrifugacao a 12.062 x g por 15 minutos e o extrato, aplicado em coluna de Sephadex G-100 com refrigeracao a 5°C. Apos eluicao da coluna com tampao fosfato 0,01 M, pH 7,0, a fracao correspondendo a maior atividade enzimatica (FI:), liofilizada e aplicada em eletroforese de gel de poliacrilamida, deu origem a tres bandas ativas, as quais foram cortadas, eluidas em agua por 24 horas, dialisadas contr
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A polifenoloxidase de banana nanica (Musa cavendishii L.) foi extraida da parte central da fruta semi-madura, em solucao de tampao fosfato 0,2 M, pH 7,0, contendo II de PVP insoluvel e 0,5a de Triton X-100 por homogeneizacao em liquidificador na temperatura ambiente. 0 extrato bruto foi precipitado com 2 volumes de acetona previamente resfriada, e a mistura mantida a uma temperatura final de -13°C. O precipitado acetonico foi re-extraido com tampao fosfato pH 7,0, contendo 0,5% de Tri- ton X-100 e estocado a -40°C por 7 dias. O material insoluvel obtido apos este periodo, foi eliminado por centrifugacao a 12.062 x g por 15 minutos e o extrato, aplicado em coluna de Sephadex G-100 com refrigeracao a 5°C. Apos eluicao da coluna com tampao fosfato 0,01 M, pH 7,0, a fracao correspondendo a maior atividade enzimatica (FI:), liofilizada e aplicada em eletroforese de gel de poliacrilamida, deu origem a tres bandas ativas, as quais foram cortadas, eluidas em agua por 24 horas, dialisadas contr
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