Clonagem molecular e expressão dos genes do cristal proteico de Bacullus thuringiensis subsp. israelensis em Escherichia coli

TL;DRAbstract

Bacillus thuringiensis subsp. Israelensis e uma bacteria entomopatogenica que produz cristais proteicos durante o processo de esporulacao. Com o objetivo de se determinar a atividade biologica das proteinas constituintes do cristal foi feita a clonagem molecular dos genes da toxina. A estrategia de clonagem consistiu-se na insercao de fragmentos de DNA plasmidial de B. thuringiensis subsp israelensis no plasmidio pUC8, resultando em plasmidios hibridos. Foram obtidos 8 clones recombinantes com atividade contra larvas de a fluviatilis e hemoliticos para eritrocitos de carneiros e um clone recombinante com atividade larvicida e nao hemolitico. Apos analise imunologica com anticorpos produzidos contra as principais fracoes proteicas de B. thuringiensis subsp israelensis, verificou-se a producao dos peptideos de 28, 33 e 38 kD nos clones recombinantes larvicidas e hemoliticos e a ausencia do peptideo de 33 kD no clone nao hemolitico Abstract

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